? ? ? ? ?PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)需要注意一些什么問題點(diǎn)呢?如何才能讓更全面的了解PCR實(shí)驗(yàn)室需要的一些問題點(diǎn)呢,深圳賽諾依照自己對(duì)行業(yè)從業(yè)16年的經(jīng)驗(yàn),給我們列出了4點(diǎn)關(guān)于PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)的一些要點(diǎn),讓我們?cè)诮▽?shí)驗(yàn)室的時(shí)候心里有底、不被別人忽悠:
? ? ? ? ?第一:樣品準(zhǔn)備區(qū)。??
? ? ? ? ?該區(qū)域無(wú)壓力設(shè)置要求。該區(qū)域用于分樣,研磨、粉碎、均勻漿料。這些粉碎、研磨和均漿處理過(guò)程中可能會(huì)產(chǎn)生氣溶膠,因此陽(yáng)性樣品可能會(huì)污染后續(xù)操作。該區(qū)與后區(qū)嚴(yán)格隔離,應(yīng)放置在與后三區(qū)隔離的獨(dú)立房間內(nèi)。在樣品準(zhǔn)備區(qū)域內(nèi)也可以設(shè)置專用的封閉區(qū)域和房間來(lái)接收和儲(chǔ)藏樣品。這個(gè)房間可以放冰箱儲(chǔ)藏樣品,應(yīng)該和樣品準(zhǔn)備區(qū)的其他區(qū)域隔離。樣品備用區(qū)的人員不得進(jìn)入試劑備用區(qū)。
? ? ? ? ?第二:擴(kuò)大和產(chǎn)品檢測(cè)區(qū)域。??
? ? ? ? ?該區(qū)域用于擴(kuò)大PCR和分析PCR。PER儀放在這個(gè)區(qū)域。房間保持負(fù)壓,目的是防止核酸溢出。在這個(gè)地區(qū),人們必須一直穿工作服。??
? ? ? ? ?手套和離開房間前脫離,防止擴(kuò)張子污染其他地方。所有用于擴(kuò)張和產(chǎn)品檢測(cè)的設(shè)備都應(yīng)指定用于該房間。PCR分析]二作也設(shè)置在該區(qū)域,例如酶切割、序列、克隆等,但實(shí)驗(yàn)室必須盡量將這些活動(dòng)分隔到不同的區(qū)域和不同的房間。降低擴(kuò)大產(chǎn)品的污染風(fēng)險(xiǎn)。如果沒有條件在該區(qū)域設(shè)置負(fù)壓,該區(qū)域必須設(shè)置排風(fēng)裝置。??
? ? ? ? ?第三:核酸提取區(qū)。??
? ? ? ? ?核酸提取區(qū)是進(jìn)行樣品核酸提取的區(qū)域。該區(qū)域?yàn)樨?fù)壓,目的是防止核酸溢出造成污染。樣品準(zhǔn)備區(qū)域包括從樣品中提取核酸和純化的區(qū)域和將核酸添加到包括PCR主反應(yīng)混合液管的操作區(qū)域。添加樣品后,PCR管蓋應(yīng)盡快蓋上。使用PCR板和蓋板時(shí),陽(yáng)性對(duì)照和含有目標(biāo)序列的樣品應(yīng)與待測(cè)樣分開操作,以免模板添加時(shí)造成交叉污染。?
? ? ? ? ?第四:試劑準(zhǔn)備區(qū)。??
? ? ? ? ?用于備考試劑。該區(qū)域?yàn)檎龎海康氖欠乐刮廴疚镆绯?。該區(qū)域內(nèi)部分為普通提取試劑的準(zhǔn)備區(qū)域、PCR試劑的準(zhǔn)備區(qū)域和PCR主反應(yīng)液的準(zhǔn)備區(qū)域。在普通提取試劑的準(zhǔn)備區(qū)域內(nèi)準(zhǔn)備樣品核酸提取時(shí)所需的分解液、提取液等PCR試劑準(zhǔn)備區(qū)域用于PCR試劑的制備和保存。例如準(zhǔn)備引物、探針等PCR試劑。為了防止交叉污染,避免反復(fù)冷凍和解凍,試劑貯藏溶液應(yīng)平均為小作業(yè)體積,貯藏在該房間后,PCR主反應(yīng)液準(zhǔn)備區(qū)進(jìn)行主反應(yīng)混合液(樣品除外)。將所有PCR所需試劑混合)添加到PCR管的操作中。重要提示:不得將其他房間的材料(包括擴(kuò)張、模板和目標(biāo)核酸或陽(yáng)性對(duì)照、供應(yīng)品或設(shè)備)帶入試劑準(zhǔn)備區(qū)。??